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ATCC 血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基介紹

更新時(shí)間:2023-08-07      點(diǎn)擊次數(shù):1584

血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種無(wú)菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基,旨在用作完整 ATCC 原代細(xì)胞解決方案系統(tǒng)中的一個(gè)組件。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基旨在支持源自正常人大血管的細(xì)胞,例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。此外,為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率,血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。

一般的

  • 具體應(yīng)用

  • 血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種無(wú)菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基,旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系統(tǒng)的一個(gè)組件。

    該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類(lèi)大血管的細(xì)胞,例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機(jī)化合物、微量礦物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率,血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。

    該系統(tǒng)旨在支持源自人類(lèi)心血管系統(tǒng)的細(xì)胞,包括以下細(xì)胞類(lèi)型:

    源自大血管的內(nèi)皮細(xì)胞

    微血管內(nèi)皮細(xì)胞

    源自大血管的平滑肌細(xì)胞

    源自心臟的肌肉細(xì)胞


    該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類(lèi)大血管的細(xì)胞,例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機(jī)化合物、微量礦物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率,血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。

    • 原代心肌細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-120-010

    • 原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-012

    • 原發(fā)性冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-021

    • 原發(fā)性肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-023

    • 原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞;正常、人類(lèi)、新生兒、ATCC  PCS-110-010

    • 原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-010

    • 原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常,人類(lèi),混合,ATCC  PCS-100-013

    • 原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-011

    • 原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-020

    • 原代肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常,人類(lèi),ATCC  PCS-100-022

    1. 慶大霉素-兩性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)

    2. 青霉素-鏈霉素-兩性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )

    3. 酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )

    4. 微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )

    5. 微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )

    6. 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )

    7. 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )

    1. 對(duì)于源自大血管的內(nèi)皮細(xì)胞(例如,正常原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Cells,ATCC PCS-100-011),用以下試劑盒之一補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基:

    2. 對(duì)于源自正常人體組織的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(例如,原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞;正常、人類(lèi)、新生兒、ATCC PCS-110-010),用以下試劑盒之一補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基:

    3. 對(duì)于源自大血管的平滑肌細(xì)胞(例如,原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,ATCC PCS-100-012),用血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒(ATCC PCS-100-042)補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

    4. 可選媒體補(bǔ)充:

處理信息

  • 處理程序

  • 完整生長(zhǎng)培養(yǎng)基的制備

    表 1.如果使用內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040),請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積: 

    成分

    體積

    最終濃度

    牛腦提取物 (BBE)

    1.0毫升

    0.2%

    重組人EGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 單位/毫升

    氫化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    10.0毫升

    2%

    抗壞血酸         0.5毫升   50微克/毫升

     

            表 2 . 如果使用內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041),請(qǐng)?zhí)砑用總€(gè)成分的一定體積:

    成分

    體積

    最終濃度

    重組人VEGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人EGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    rh FGF 堿性

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人IGF-1

    0.5毫升

    15納克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 單位/毫升

    氫化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    10.0毫升

    2%

    抗壞血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

           
    表 3
     . 如果使用血管平滑肌生長(zhǎng)試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042),請(qǐng)?zhí)砑用總€(gè)組件的一定體積:

    成分

    體積

    最終濃度

    rh FGF-堿性

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人胰島素

    0.5毫升

    5微克/毫升

    抗壞血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    重組人EGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

     

    表 4.如果使用微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040),請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積: 

    成分

    體積

    最終濃度

    牛腦提取物 (BBE)

    1.0毫升

    0.2%

    重組人EGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 單位/毫升

    氫化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    抗壞血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

           表 5 . 如果使用微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041),請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積:

    成分

    體積

    最終濃度

    重組人VEGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人EGF

    0.5毫升

    5納克/毫升

    rh FGF 堿性

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人IGF-1

    0.5毫升

    15納克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 單位/毫升

    氫化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    抗壞血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

    表 6.如果使用心肌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040),請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積:

    成分

    體積

    最終濃度

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    胎球蛋白

    5.0毫升

    25毫克/毫升

    重組人FGF-b

    0.5毫升

    5納克/毫升

    重組人胰島素

    0.5毫升

    5毫克/毫升

    抗壞血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

    重組人EGF/TGF-b1

    0.5毫升

    5 納克/毫升,30 皮克/毫升

     

    增殖不需要抗菌劑和酚紅,但如果需要可以添加。表 7 總結(jié)了添加到完整生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的每種可選組分的建議體積。

    1. 從冰箱中取出一套生長(zhǎng)套件;確保所有組件的蓋子均已擰緊。

    2. 在將生長(zhǎng)套件的組件添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中之前將其解凍。在添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基之前,需要在 37°C 水浴中加熱 L-谷氨酰胺組分并搖動(dòng)以溶解任何沉淀物。

    3. 從冷藏處獲取一瓶血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (475 mL)。

    4. 用 70% 乙醇噴灑所有生長(zhǎng)套件組件小瓶和基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶的外表面,以凈化它們。

    5. 使用無(wú)菌技術(shù)并在層流罩或生物安全柜中工作,使用單獨(dú)的無(wú)菌移液器將表 1、2、3、4 或 5 中所示的每個(gè)生長(zhǎng)套件組件的體積轉(zhuǎn)移到基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶中轉(zhuǎn)移。

表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅(可選)

成分

體積

最終濃度

慶大霉素-兩性霉素B溶液

0.5毫升

慶大霉素:10 µg/mL

兩性霉素 B:0.25 µg/mL

青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液

0.5毫升

青霉素:10 單位/mL

鏈霉素:10 µg/mL

兩性霉素 B:25 ng/mL

酚紅

0.5毫升

33微米

  1. 蓋緊生長(zhǎng)培養(yǎng)基的瓶子并輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物以確保溶液均勻。請(qǐng)勿用力搖晃,以免產(chǎn)生泡沫。給瓶子貼上標(biāo)簽并注明日期。

  2. 完整的生長(zhǎng)培養(yǎng)基應(yīng)在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存(不要冷凍)。在這些條件下儲(chǔ)存時(shí),完整培養(yǎng)基可穩(wěn)定保存 30 天。 

冷凍保存

1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
2. 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基保存在 2°C 至 8°C 下。不要凍結(jié)。避光。使用前加熱介質(zhì)時(shí),溫度不要超過(guò) 37°C。當(dāng)在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲(chǔ)存時(shí),產(chǎn)品在標(biāo)簽上的有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。


細(xì)菌和真菌測(cè)試:沒(méi)有檢測(cè)到

支原體污染:沒(méi)有檢測(cè)到

內(nèi)毒素:< 0.5 EU/毫升

滲透壓:270±10毫滲透壓/千克

酸堿度:7.8±0.3

功能測(cè)試:增殖率和形態(tài)

本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用。它不適用于任何動(dòng)物或人類(lèi)治療用途、任何人類(lèi)或動(dòng)物消費(fèi)或任何診斷用途。


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